SU-DHL-4人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞
細(xì)胞別稱(chēng)：SU-DHL-4；人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞；人B淋巴瘤細(xì)胞
種屬來(lái)源：人
年齡性別：男性，38歲
組織來(lái)源：腹腔積液
生長(zhǎng)特性：懸浮生長(zhǎng)
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
背景簡(jiǎn)介：SU-DHL-4細(xì)胞系建系于1976年，來(lái)自38歲白人男性的腹膜滲出物。該細(xì)胞系有14號(hào)、18號(hào)染色體易位。在BCL-2基因中有一個(gè)主要的重排。該細(xì)胞系對(duì)念珠菌攝入呈陰性。有資料顯示該細(xì)胞對(duì)愛(ài)潑斯坦-巴爾病毒（EBV）呈陰性。
生物安全等級(jí)：1
細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝
支原體檢測(cè)：無(wú)
培養(yǎng)基：RPMI-1640+10% FBS+PS
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃
凍存條件：凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基：+40%FBS+5%DMSO 溫度：液氮
倍增時(shí)間：~40小時(shí)
傳代比例：1:2-1:5
換液頻率：2~3次/周
英文名稱(chēng) | SU-DHL-4 | 規(guī)格 | 1×106cells |
種屬 | 人 | 生長(zhǎng)特性 | 懸浮生長(zhǎng) |
細(xì)胞形態(tài) | 淋巴母細(xì)胞樣 | 貨號(hào) | E-XB6266 |
用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) | 貨期 | 現(xiàn)貨 |
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否*揮發(fā)，細(xì)胞是否解凍，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。.觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置2-4h。
4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
5. 請(qǐng)客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。
6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問(wèn)題解決。
7. 該細(xì)胞僅供科研使用。
8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。
9. 注意： 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。
1)復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10 cm皿中，加入約8 mL培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1 mL消化液(0.25%Trypsin-0.02% EDTA)于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2 min(視細(xì)胞情況而定)，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml*培養(yǎng)基終止消化。輕輕打勻后裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm離心5 min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2 mL培養(yǎng)液后吹勻。
c、將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的含8 mL培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中，置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
3)細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例;
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
小鼠胰島β細(xì)胞 | 小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1（種屬鑒定) |
大鼠表皮干細(xì)胞 | 人惡性黑色素瘤細(xì)胞帶熒光素酶SK-MEL-2+luc（STR鑒定） |
大鼠皮下微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 人結(jié)腸癌細(xì)胞COLO205(STR鑒定正確) |
大鼠脂肪細(xì)胞 | 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤Y79(STR鑒定正確) |
大鼠前脂肪細(xì)胞 | 人神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞帶綠色熒光U251+GFP(STR鑒定正確) |
大鼠脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 人組織細(xì)胞淋ba瘤細(xì)胞U-937(STR鑒定正確) |
大鼠真皮毛乳頭細(xì)胞 | 小鼠骨髓瘤B淋ba細(xì)胞SP2/MIL-6（種屬鑒定） |
大鼠中耳上皮細(xì)胞 | 小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞MA-891（種屬鑒定） |
大鼠肌腱干細(xì)胞 | 人肺腺癌細(xì)胞Calu-1(STR鑒定正確) |
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 | 鼻咽癌細(xì)胞株 5-8F（STR鑒定） |
大鼠脂肪干細(xì)胞 | 人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞IMR-32(STR鑒定正確) |
大鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞 | 人結(jié)直腸癌細(xì)胞氟尿嘧耐藥株SW620/5FU(STR鑒定正確) |
大鼠毛囊干細(xì)胞 | SU-DHL-4人彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞人肝癌細(xì)胞SNU-387(STR鑒定正確) |
大鼠膈肌細(xì)胞 | 人甲狀腺癌細(xì)胞TT (STR鑒定正確) |
大鼠肌腱成纖維細(xì)胞 | 人口腔鱗癌順耐藥株SCC25+DDP(STR鑒定正確) |
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