商品描述：
產品名稱 | Claycomb Medium培養基 | 規格 | 500mL |
用途 | 僅供科研研究實驗 | 貨號 | EY-XP4253 |
產品介紹
產品別名
HL-1 Medium不含L-谷氨酰an，液體，無菌過濾，適合細胞培養。
Claycomb培養基是以建立HL-1細胞系的William Claycomb博士命名的，它專用于培養小鼠心肌細胞生長。HL-1是第一個能夠在 體外維持分化心肌細胞表型和收縮活性的細胞系。HL-1細胞系可用于研究心肌梗塞后的心肌細胞肥大、測試新型心臟治療藥物和療法、生產高水平心肌蛋白以及研究成熟心肌細胞特異性基因。補充100 μM去甲腎上腺su、10％胎牛血清（FBS）和4mM L-谷氨酰an的Claycomb培養基，將能夠維持HL-1細胞系和成熟心肌細胞的行為。在光學顯微鏡下觀察HL-1細胞時，可以觀察到細胞個體和群體的收縮隨心肌細胞逐漸融合而變得更加頻繁。
運輸和保存
放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸（儲存條件2-8℃ 避光儲存）產品保質期12個月。
注意事項：
僅限科研用。
培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1） 準備DMEM-H培養基(添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據實驗需要選擇懸浮培養基，使293T細胞懸浮生長。
2） 培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
公司正在出售的產品：
人胚腎上皮包裝細胞 | 兔原代腎上皮細胞專用培養基 |
滋養層上皮細胞 | 大鼠原代肺大動脈外膜成纖維細胞專用培養基 |
黑色瘤細胞 | 大鼠原代下丘腦神經元細胞專用培養基 |
宮頸癌細胞 | 小鼠原代膀胱上皮細胞專用培養基 |
人正常鱗狀上皮細胞 | 兔原代子宮平滑肌細胞專用培養基 |
大鼠胰島瘤細胞 | 小鼠原代頸動脈內皮細胞專用培養基 |
人肺扁平上皮癌細胞 | 小鼠原代髓核細胞專用培養基 |
低轉移肺癌細胞 | 人原代Treg細胞專用培養基 |
肺癌細胞 | 大鼠原代心肌干細胞專用培養基 |
人胃腸間質瘤細胞 | 小鼠原代晶狀體上皮細胞專用培養基 |
B16-F10小鼠黑色瘤細胞 | 兔原代脂肪細胞專用培養基 |
人胃腺癌細胞 | 人原代肝竇內皮細胞專用培養基 |
人口腔鱗癌細胞 | 人原代宮頸平滑肌細胞專用培養基 |
舌癌細胞 | Claycomb Medium培養基人原代膽管成纖維細胞專用培養基 |
喉癌細胞 | 人原代臍靜脈內皮細胞專用培養基 |
操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內解凍，使細胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
點擊放大
